Изменения показателей местного иммунитета десны и ротовой полости больных при лечении хронического пародонтита
У 203 больных пародонтитом разной степени тяжести и 20 здоровых лиц с помощью
исследования слюны, ротовой жидкости, периферической крови десны оценено
состояние местного иммунитета ротовой полости. Установлено, что пародонтит
протекает на фоне сниженных показателей фагоцитарной активности нейтрофильных
лейкоцитов и существенных изменений популяционного и субпопуляиионного состава
лимфоцитов периферической крови десны, в разной степени выраженным возрастанием
в слюне содержания цитокинов (интерлейкины-1b, -4; фактор некроза опухоли -а,
интерферон-g); при тяжелом течении заболевания в слюне отмечено сниженное
содержание секреторных иммуноглобулинов (slgA). При проведении комплексного
лечения определяется коррекция местного иммунитета полости рта у больных
хроническим пародонтитом.
По данным мировой литературы, распространенность заболеваний пародонта достигает
98%, среди них ведущую роль играет хронический пародонтит. Среди многих
факторов, обусловливающих возможности возникновения и определяющих течение
хронического пародонтита, важнейшим является состояние местных механизмов защиты
ротовой полости [1,2,6]. На фоне ухудшения экологической обстановки, роста
аллергических заболеваний среди населения остается актуальным как поиск новых
методов терапии хронического пародонтита, так и средств контроля их лечебной
эффективности [6]. Одним из возможных объективных критериев качества лечения, по
всей видимости, может являться изменение в результате терапии активности местных
факторов и механизмов иммунитета. Ввиду этого нами были исследованы показатели
статуса и реактивности местных механизмов иммунитета полости рта у больных
хроническим пародонтитом с различными степенями тяжести данной патологии до
лечения и после его окончания.
Материал и методы
В исследовании использован материал (слюна, ротовая жидкость, периферическая
кровь десны), полученный от 250 больных лародонтитом разной степени тяжести и 20
здоровых лиц.
Результаты и обсуждение
При оценке клинической эффективности лечения применялись клинические индексы, определявшиеся в динамике лечения. До лечения у пациентов с легкой степенью поражения пародонта эти параметры составили: ИГ - 1,9±0,1; ПИ - 4,6±0,9; при средней тяжести: ИГ - 2,58±0,5; ПИ - 5,5±0,4; при тяжелой степени: ИГ - 3,17±0,84; ПИ - 6,97±0,6 (г<0,02). После проведения лечебных мероприятий параметры соответственно составили : ИГ-0,12±0,1;ПИ-0,88±0,6; ИГ-0,14±0,1; ПИ - 2,56±0.8; ИГ - 0,26±0,4; ПИ - 5,98+0,8 (r<0,02).
При проведении цитологического исследования выявлено, что после проведенного нами местного лечения процент целостности клеток достоверно увеличился. Количество эпителиальных клеток увеличилось в три раза, а число ПМЯЛ и мононуклеаров уменьшилось вдвое (таблица 1), что может свидетельствовать о купировании воспалительного процесса и индукции регенераций тканей пародонта. Показатели поглотительной активности фагоцитов периферической крови десны у больных хроническим пародонтитом любой степени тяжести были достоверно снижены в сравнении с нормальными. После лечения эти показатели также оставались сниженными. Показатели спонтанной активации кислородзависимого метаболизма лейкоцитов по данным спонтанного НСТ-теста в 2-2.5 раза превышали нормальные. В условиях стимуляции латексом уровень активации кислородзависимого метаболизма фагоцитирующих клеток у больных хроническим пародонтитом значительно превосходил нормальные показатели, однако был незначительно выше, чем в спонтанном НСТ-тесте. После лечения существенных изменений в уровне спонтанной и индуцированной активации кислород-зависимого метаболизма фагоцитов не отмечалось.
Таблица 1. Клеточный состав и активность фагоцитарных клеток содержимого десневого кармана больных хроническим пародонтитом с разными степенями тяжести до и после лечения Показатели Легкая степень Средняя степень Тяжелая степень Норма До лечения После лечения До лечения После лечения До лечения После лечения Целые клетки (%) 71,3±2,1* 73,9±1,6** 65,5±0,9* 70,8±1,4** 65,2±1,4* 73,8±1,2** 81,5±0,6 Ядра(%) 9,7±1,0 16,0±0,9 14,0±1,5 17,5±0,6 16,0±1,5 15,5±0,6 4,5±0,2 Разрушенные клетки (%) 19,0±2,0* 10,1±1,4** 20,5±2,2* 11,7±1,1** 8,8±0,2* 10,7±1,2** 4,0±0,5 Эпителиальные (%) 16,5±1,5* 45,1 ±1,7** 16,0±1,5* 44,2±2,2** 17,0±1,5* 48,0±1,5** 79,4±1,6 Полиморфно-ядерные (%) 77,0±1,3* 51,6±1,5** 69,0±1,0* 50,3±1,4** 73,0±1,3* 43,5±1,3** 17,7±0,2 Мононуклеарные (%) 6,5±1,4* 3,3±2,1 15,0±2,2* 5,5±0,8 10,0±1,8* 8,5±1,1 2,9±0,8 Фагоцитарный индекс (% активных фагоцитов) 50,75±0,8* 53,6±1,2* 41,75±1,4* 52,3±3,2* 43,3±1,6* 47,8±2,4* 71,5±0,1 НСТ-спонтанный (% активации) 60,5±0,6* 58,0±1,1* 51,6±1,1* 52,4±0,9* 42,6±1,3* 46,0±0,7* 29,0±0,1 НСТ-спонтанный (% активации) 60,5±0,6* 58,0±1,1* 51,6±1,1* 52,4±0,9* 42,6±1,3* 46,0±0,7* 29,0±0,1 Нст-индуцированный (% активации) 68,3±0,9* 66,0±2,4* 48,6±1,1* 58,9±2,3* 43,5±1,8* 53,2±1,4* 36,0±0,1
Различия показателей в группах достоверны при р<0,05: от нормы *, до и
после лечения **.
При проведении CD-типирования лимфоцитов периферической крови десны было
установлено, что у больных хроническим пародонтитом легкой и средней степеней
тяжести число зрелых периферических Т-лимфоцитов (CD3+ клетки) было достоверно
ниже нормального (таблица 2). В результате лечения показатель содержания этих
клеток при легкой степени увеличивался и достигал уровня нормы, при средней
степени тяжести - достоверно возрастал в сравнении с нормальным, а при тяжелой -
в сравнении с нормой не изменялся.
Таблица 2. Экспрессия CD-маркеров (% позитивных клеток) на лимфоцитах
периферической крови десны до и после лечения больных хроническим пародонтитом с
разными степенями тяжести
Различия показателей в группах достоверны при р<0,05: от нормы *, до и
после лечения **
Содержание в популяции периферических десневых лимфоцитов СD4+-клеток (Т
хелперы-индукторы) при хроническом пародонтите любой степени тяжести было
повышено.
Удельное содержание Т-цитотоксических лимфоцитов (СD8+-клетки) при легкой степени было достоверно повышенным, а при средней и тяжелой степенях не отличалось от контрольного. После лечения больных хроническим пародонтитом легкой степени их содержание нормализовалось, при среднетяжелой и тяжелой достоверных изменений в содержании СD8+-клеток отмечено не было.
Иммунорегуляторный коэффициент CD4/CD8 (соотношение основных субпопуляций Т-лимфоцитов) при легких пародонтитах достоверно понижался (в основном за счет возрастания количества CD8+ клеток), а при среднетяжелых и тяжелых - достоверно возрастал. В результате лечения значения коэффициента при легкой форме возрастали до значений достоверно более высоких, чем в норме, а при среднетяжелой и тяжелой - имели тенденцию к снижению, хотя и не достигали нормальных значений.
Содержание клеток, несущих маркер естественных киллеров (CD16+), было снижено, наиболее выражено при средней и тяжелой степенях. В результате лечения их содержание при всех степенях тяжести восстанавливалось до нормальных значений.
Таблица 3. Содержание иммуноглобулинов в слюне (г/литр) до и после лечения больных пародонтитом с разными степенями тяжести Больные пародонтитом: IgG IgA sIgA Легкой степени До лечения 0,25±0,10 0,18±0,05 0,44±0,10 После лечения 0,24±0,17 0,18±0,08 0,45±0,24 Средней тяжести До лечения 0,31±0,10 0,22±0,07 0,46±0,10 После лечения 0,31±0,14 0,21±0,08 0,47±0,12 Тяжелым До лечения 0,33±0,24 0,19±0,09 0,32±0,10 После лечения 0,32±0,02 0,19±0,05 0,43±0,26* Норма 0,08±0,03 0,14±0,05 0,53±0,03
Различия показателей в группах достоверны при р<0,05: от нормы *, до и
после лечения **
Число В-лимфоцитов (CD22+ клетки) при легкой степени было на уровне нормы, а при
среднетяжелой и тяжелой - достоверно снижено.
Экспрессия на лимфоцитах периферической крови десны рецепторов, маркирующих активационные процессы, была различной. Количество клеток, несущих CD71, при заболевании сохранявшееся на нормальном уровне, и клеток с рецептором программирования клеточной гибели (CD95+), при хроническом пародонтите возраставшее, в процессе лечения достоверно не изменялось.
Клетки CD25+ (несущие рецептор для интерлейкина-2) при легкой и средней степенях были достоверно снижены. После лечения их число возрастало, но не достигало нормальных величин. При тяжелой степени число клеток с данным маркером было на уровне нормы как до, так и после лечения.
Экспоненция на клетках периферической крови десны HLA-DR антигенов при легкой и средней тяжести заболевания была достоверно снижена, при тяжелой - достоверно увеличена. После лечения легкой и средне-тяжелой степеней хронического пародонтита число HLA-DR+ клеток достоверно возрастало как в сравнении с исходным уровнем, так и в сравнении с нормой, а при тяжелой степени их содержание снижалось до нормального уровня.
У всех больных хроническим пародонтитом, в слюне отмечено достоверное (в сравнении с нормой) повышение содержания иммуноглобулинов класса IgG; недостоверное - содержания IgA, a slgA - имело тенденцию к снижению при легком и среднетяжелом пародонтите, а при тяжелом было достоверно снижено. После успешного лечения содержание в слюне больных IgG и IgA при всех степенях тяжести обнаруживало тенденцию к снижению, a slgA - возрастанию, причем после лечения тяжелых хронических пародонтитов его уровень был достоверно выше, чем исходный.
При исследованиях концентрации цитокинов в слюне (таблица 4) было установлено, что у пациентов с хроническим пародонтитом она была выше нормальной, однако степень такого повышения для разных медиаторов существенно варьировала. Содержание ФНО-а - ведущего провоспалительного иммуноцитокина острой фазы, при пародонтите возрастало в 6-10 раз, было примерно одинаково у больных с легкой и тяжелой, и существенно выше - среднетяжелой степенью поражения пародонта. Количество ИЛ-1b и ИЛ-4 у больных хроническим пародонтитом было увеличено соответственно в 2-2,5 и 0,5-3 раза и при разных степенях тяжести достоверно не различалось. Показатели содержания в слюне ИФ-g при хроническом пародонтите разной степени тяжести превышали нормальные на 20-800% их значений: у пациентов второй группы (среднетяжелое течение) они было достоверно ниже, нежели у таковых первой и третьей групп.
Таблица 4. Содержание некоторых цитокинов в слюне больных хроническим пародонтитом с разными степенями тяжести до и после лечения Содер-жание: Легкая степень Средняя степень Тяжелая степень Норма До лечения После лечения До лечения После лечения До лечения После лечения ФНО-а (пкг/мл) 976,8033±
18,76* 417,56±
80,62*,** 12407,6717±
26,86 * 264,44±
38,24*,** 744,6649±
33,34*, *2-3 164,30±
24,18** 124,3365±
78,224 ИЛ-1b (пкг/мл) 186,0353±
26,67* 360,20±
47,37*,** 226,7725±
13,888* 228,30±
36,24* 239,7783±
7,85* 252,66±
72,66* 97,6442±
11,226 ИЛ-4
(пкг/мл) 18,6946±
1,789 122,49±
38,64*,** 27,8973±
3,224* 97,87±
22,77*,** 30,3464±
7,778* 24,89±
18,65* 12,7742±
3,225 ИФ-g
(пкг/мл) 465,3692±
49,558* 252,66±
72,66*,** 460,33±
8,55* 584,67±
102,64* 793,32±
122,11* 52,10±
7,4** 38,45±
7,34 Различия показателей в группах достоверны при р<0,05: от нормы *, до и после лечения **
В результате лечения в слюне больных отмечено уменьшение содержания резко повышающегося при заболевании ведущего провоспалительного цитокина ФНО-а.
По окончании лечения у больных легким и среднетяжелым хроническим пародонтитом отмечается достоверное возрастание содержания ведущего противовоспалительного цитокина - ИЛ-4, а при тяжелом, протекающем на фоне его повышенного уровня - снижение.
На основании вышеизложенного можно заключить, что развитие хронического пародонтита сопровождается существенными изменениями состояния иммунных механизмов защиты ротовой полости, проявляющимися в местных изменениях состава клеток крови десны (в том числе количественного соотношения популяций и субпопуляций лимфоцитов), а также содержания в слюне иммуноглобулинов и цитокинов. Данные изменения варьируют в зависимости от степени повреждения пародонта и отражают процессы местного воспаления и активации иммунных механизмов защиты (преобладание в клеточном составе мигрировавших в очаг полиморфноядерных и мононуклеарных лейкоцитов, повышенная активность фагоцитов в спонтанном НСТ-тесте, возрастание содержания провоспалительных цитокинов, прежде всего - ФНО-а и ИЛ-1b; увеличенное число Т-лимфоцитов с маркером хелперов - CD4+, возрастание концентрации в слюне иммуноглобулинов IgG и IgA, а также цитокинов с профилем поддержки клеточного (ИФ-4) и гуморального (ИЛ-4) иммунного ответа. В то же время ряд показателей из числа изученных свидетельствует об имеющейся при пародонтите недостаточности местных механизмов иммунитета (подавленный показатель поглотительной активности фагоцитов, сниженная способность к активации кислородзависимого метаболизма в индуцированном НСТ-тесте, низкая концентрация секреторных иммуноглобулинов sIgA).
Успешное лечение хронического пародонтита сопровождается нормализацией состава клеток пародонтального кармана (преобладание эпителиоцитов над лейкоцитами, снижение количества деструктированных клеток; нормализация содержания CD 16+ CD22+ клеток) и изменениями проявлений воспаления и активности местных механизмов иммунитета: увеличением поглотительной способности фагоцитов и снижением показателей их активности в спонтанном при возрастании - в индуцированном НСТ-тесте, тенденцией к нормализации содержания иммуноглобулинов в виде снижения IgG и IgA и повышения slgA, снижением содержания провоспалительного цитокина при возрастании - противовоспалительного ИЛ-4. В то же время, несмотря на позитивные клинические результаты лечения, изученные показатели демонстрируют ряд остаточных признаков воспалительного процесса и имевшейся недостаточности местных механизмов иммунитета. К таковым можно отнести продолжающие оставаться пониженными в сравнении с нормой показатели поглотительной активности фагоцитов и повышенную активность - при постановке НСТ-тестов, сохраненное увеличение иммунорегуляторного индекса CD4/CD8, продолжающееся оставаться увеличенным в сравнении с нормой содержание IgG, IgA и ФНО-а. Таким образом, исследование клеточного состава пародонтального кармана, функциональной активности фагоцитов и популяционного состава лимфоцитов периферической крови десны и концентрации иммуноглобулинов и цитокинов в слюне позволяют оценить степень эффективности терапии больных с разной тяжестью поражения тканей пародонта.
Литература: Булгакова А.И. Совершенствование местной терапии хронического генерализованного пародонтита: Автореф. дис.... канд. мед. наук. - М. 1999. - 22 с. Булгакова А. И, Медведев Ю.А., Чемикосова Т.О.. Ва-леев И.В. Влияние пиобактериофага поливалентного и интерферона на лечение хронического генерализованного пародонтита. // Иммунол., аллергол., инфектол. - 2000. №2. - С. 2-4. Петров Р.В., Лопухин Ю.М, Чередеев А.Н. и др. Оценка иммунного статуса человека. - М., 1984. - 36 с. Сибиряк С.В., Юсупова Р.Ш., Курчатова Н.Н. Иммунофенотипирование лимфоцитов в клинической практике. -Уфа, 1997.-22 с. Иммунология, иммунопатология и проблемы иммунотерапии в ринологии. Под ред. Арефьевой Н.А. - Уфа: 1997.-120 с. Современные аспекты клинической пародонтологии. Под ред. Дмитриевой Л.А. - Москва: 2001. - 125 с. Фрейдлин И.О. Цитокины в клинике. // Современные проблемы аплергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. Сб. трудов РААКИ. - М., 1998. - С. 104-119.
Источник: http://rusmg.ru
Комментарии