Динамические изменения кислородзависимой функции нейтрофилов при моделированном спаечном процессе брюшины

В.А.Липатов, М.С.Гомон, А.Л.Локтионов, А.В.Беседин, И.Л.Локтионова
Курский государственный медицинский университет
Кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии
Кафедра анатомии человека
Кафедра биохимии
Кафедра микробиологии

По поводу спаечной болезни брюшины (СББ) ежегодно в хирургических отделениях лечится 1% прооперированных ранее больных, кишечная непроходимость развивается у 50-75% пациентов со СББ, ее консервативное лечение малоэффективно. После операций по поводу спаек брюшной полости рецидивы заболевания составляют 32–71%, летальность при спаечной кишечной непроходимости колеблется в пределах 13–55%, надежные средства профилактики послеоперационного спаечного процесса брюшной полости (СПБП) до настоящего времени находятся на стадии разработки [2, 4, 7, 11, 12].

Большинство авторов едины во мнении, что основным этиопатогенетическим фактором заболевания является повреждение мезотелия брюшины и воспаление с преобладанием его пролиферативной фазы [1, 8, 13].

Многие хирургические заболевания сопровождаются выраженными изменениями в иммунной системе, характеризующимися как состояние вторичного иммунодефицита. Этому способствует комплекс патологических факторов основного заболевания, стресс, обезболивание, операционная травма [6]. Исследование иммунного статуса и попытки его коррекции у больных хирургического профиля показали, что применение иммуномодуляторов в комплексе современных методов лечения способствует ликвидации послеоперационных осложнений, ускоряет заживление тканей, уменьшает время реабилитации больных после операции [9].

Ведущую роль в индукции воспаления играют полиморфно-ядерные лейкоциты. Они мигрируют из кровотока в ткани и выполняют свои защитные функции. Продукты стимулированных нейтрофилов влияют на активность макрофагов, лимфоцитов, тромбоцитов; вызывают дегрануляцию тучных клеток; активируют системы комплемента, свертывания крови, фибринолиза в зоне травматического повреждения брюшины [3, 10]. В современной литературе нет однозначных данных о состоянии иммунитета и факторов неспецифической резистентности при СББ.

Исходя из этого, целью нашего исследования явилось изучение динамических изменений факторов неспецифической резистентности организма при экспериментальном СПБП.

Эксперименты проводили на здоровых половозрелых крысах-самцах линии Вистар, массой 250-300 г, содержащихся на стандартном пищевом и питьевом рационе в условиях вивария КГМУ. Исследования выполняли с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986).

В стерильных условиях под рометаровым наркозом проводилось моделирование СПБП. После срединного лапаротомного разреза выполнялось гидравлическое препарирование брюшины вентральной стенки с последующим ее иссечением на площади 1 х 1 см, отступя 1 см от края срединной раны. Слепая кишка подвергалась скарификации на всей поверхности до появления «кровавой росы».

Животные выводились из эксперимента путем передозировки наркоза на 3, 7 и 14 сутки. Оценивались морфологические изменения в брюшной полости с использованием визуально-описательного метода и оценкой выраженности СПБП методом семантического дифференциала. Органы, вовлеченные в СПБП изымались из трупов, фиксировались в 10% растворе нейтрального формалина с последующим изготовлением парафиновых срезов и их окраской гематоксилин-эозином, пикро-сириус-ред и по Маллори.

Кислородозависимую активность нейтрофилов определяли по реакции восстановления нитросинего тетразолия. НСТ-тест основан на поглощении фагоцитами нитросинего тетразолия из среды и последующим его восстановлением внутри клетки до диформазана. Реакция с интактными нейтрофилами характеризует степень «функционального раздражения» этих клеток in vivo (НСТ-тест спонтанный); показатели НСТ-теста у нейтрофилов, стимулированных in vitro зимозаном, опсонизированным и неопсонизированным, можно рассматривать как критерий активности при напряжении их кислородозависимой функций (НСТ-тест стимулированный н/з и о/з). Индекс стимуляции нейтрофилов на все виды зимозана (КАо, КАн, КО): отношение диформазан-позитивных клеток в стимулированной реакции к диформазан-позитивным клеткам в спонтанной реакции НСТ-теста [5].

Во всех случаях на всех сроках деформированная слепая кишка была фиксирована плоскостной спайкой к вентральной стенке в месте ее десерозирования. У некоторых животных в СПБП вовлекались петли кишечника, сальник и другие мобильные органы брюшной полости. Выраженность СПБП на 3 сутки составила 2,35±0,22 балла, на 7 сутки произошло незначительное, но статистически достоверное уменьшение его выраженности (p