Эффективный и безопасный метод репрограммирования клеток-предшественников для использования в клеточной терапии

Несмотря на успехи последних лет в области репрограммирования соматических клеток и индукции их плюрипотентности, остается неясным, какие клетки лучше использовать и насколько примитивный статус им возвращать, если предполагается использовать их в клеточной терапии.

Требуется репрограммирование к плюрипотентности коммитированных клеток, уже начавших специализацию, но это может увеличивать риск неоплазии и появления нежелательных типов клеток. Лучше всего для трансплантации подошли бы клетки-предшественники из того органа, который нуждается в клеточной терапии. Как правило, этим клеткам недостает лишь одного из принципиально необходимых качеств – способности к продолжительному самообновлению.

Группа корейских ученых из сеульского Medical Research Institute, Chung-Ang University College of Medicine поставила целью своей работы придание клеткам-предшественникам способности к регулируемому самообновлению исключительно in vitro с последующей дифференцировкой в нужный тип клеток in vivo. При этом отпадает необходимость в возвращении этим предшественникам плюрипотентности.

Ученые получили «индуцированные клетки-предшественники с регулируемым самообновлением» ("induced conditional self-renewing progenitor (ICSP) cells") из человеческих клеток центральной нервной системы. В экспериментах проверяли их эффективность, безопасность, приживаемость после трансплантации и терапевтическую применимость.

Для управления пролиферацией клеток в них был встроен ген v-myc, строго регулируемый тетрациклиновой (Tet)-системой включения генной экспрессии. Добавление Tet в культуральную среду активирует транскрипцию и трансляцию гена myc, что дает возможность быстрого размножения клеток ex vivo, в результате чего получается однородная клональная популяция кариотипически нормальных человеческих ЦНС-предшественников. При отсутствии Tet экспрессия myc также отсутствует и самообновление клеток полностью инактивировано (что исключает возможность опухолевого роста). После трансплантации клеток-предшественников крысам их пролиферация прекращается и они дифференцируются в электрофизиологически активные нейроны и другие типы клеток ЦНС. Клетки трансплантировали крысам как во время эмбрионального развития, так и взрослым после повреждения ЦНС – в этом случае происходило восстановление нарушенных функций. Не наблюдалось никаких признаков неоплазии, избыточного роста, деформации, появления клеток не-нервных типов, фенотипической или генотипической нестабильности. Не возникало также необходимости в иммуносупрессии.

Таким образом, предложенная стратегия получения большого количества пригодных для трансплантации клеток-предшественников доказала свою эффективность, безопасность и практическую применимость.

По мнению доктора П.И. Катуняна, главного врача московского Центра медико-биологических технологий, использование этого метода может значительно улучшить результаты клеточной терапии различных заболеваний.

Источник: www.stemcells.ru