Морфологические исследования внутриглазных жидкостей в оценке патофизиологических механизмов развития набухающей катаракты

В.М. Малов, С.Н. Шатохина, Е.Б. Ерошевская, В.Н. Шабалин, А.А. Девяткин, И.В. Малов
Самарский государственный медицинский университет, Российский НИИ геронтологии Минздрава РФ, Москва

Morphological study of intraocular fluids in the evaluation of pathophysiological mechanisms of swelling cataract development
V.M. Malov, S.N. Shatohina, E.B. Eroshevskaya, V.N. Shabalin, A.A. Devyatkin, I.V. Malov

Authors carried out morphological study of aqueous humour and lens fluid in 7 patients with swelling cataract. 7 patients with immature senile cataract were taken as a control group.

Morphological study of aqueous humour and lens fluid was performed with the help of wedge and edge dehydration of aqueous humour and lens fluid.

Systemic structure of aqueous humour in swelling cataract was characterized by clumpy and crystalline type of fractions in 5 patients and by crystalline type– in 2 patients. Exploration of local structure of aqueous humour showed that lamellar and dendrite–like structures with plenty of minor anisotropic inclusions were the distinctive feature of swelling cataract group.

This morphological picture, observed in lens, is typical for congestive and physically and chemically heterogeneous fluid. Fraction of lens fluid has anisotropic effect in the polarized light along the cracks, and this certify the fact of co–operation of protein, lipid and saline complexes.

Thus, swelling cataract, complicating the course of senile cataract, has it’s reflection in the morphological picture of aqueous humour in the form of atypical structures and morphotypes. They testify to acute and deep metabolic eye abnormalities, which could be used in the studying of pathophysiological mechanisms of development of swelling cataract.

Актуальность. Осложнением прогрессирующей катаракты может быть резкое повышение внутриглазного давления. Факогенная глаукома может развиться в незрелой стадии старческой катаракты – при бурном оводнении хрусталика (набухающая катаракта) – это факоморфическая глаукома. Хрусталик значительно увеличивается в объеме за счет аккумуляции в себе водянистой влаги, блокирует угол передней камеры, вызывая повышение внутриглазного давления. Развивается типичная картина острого приступа глаукомы (Нестеров А.П., 1995).

Используя современные хирургические приемы, удается получить аккумулированную хрусталиком водянистую влагу – хрусталиковую жидкость для проведения ее лабораторного исследования.

Объект, материал для исследования, методы. В данную работу вошло 14 пациентов. Возраст больных – от 60 до 85 лет. В работе представлены результаты морфологического исследования водянистой влаги и хрусталиковой жидкости 7 больных с набухающей катарактой. В качестве контроля была исследована водянистая влага 7 больных с незрелой старческой катарактой.

В момент операции, перед заполнением передней камеры вискоэластиками, у пациентов через парацентез роговицы в прозрачной части лимба инсулиновым шприцом брали водянистую влагу в объеме 80–100 мкл. Для взятия хрусталиковой жидкости у больных с набухающей катарактой выполняли прокол иглой инсулинового шприца передней капсулы хрусталика и делали забор хрусталиковой жидкости в объеме до 40 мкл.

Морфологическое исследование водянистой влаги и хрусталиковой жидкости. Метод клиновидной дегидратации. Данный метод разработан С.Н. Шатохиной и В.Н. Шабалиным. На предметное стекло наносили каплю водянистой влаги или хрусталиковой жидкости в объеме 20 мкл. Капля высушивалась при температуре 20–25°С, относительной влажности 65–70% и при минимальной подвижности окружающего воздуха. Продолжительность периода высыхания составляла 18–24 часа.

В процессе дегидратации происходит разделение органических и неорганических компонентов капли. Формирование зон в ограниченном объеме биологической жидкости, имеющем форму, близкую к полусфере, происходит по определенным закономерностям. Испарение осуществляется равномерно по всей открытой поверхности капли, и вследствие того, что полусфера имеет разную толщину слоя в центре и на периферии, происходит неравномерное изменение концентрации растворенных веществ. Концентрация в тонкой (краевой) зоне возрастает более быстрыми темпами по сравнению с центральной (толстой) зоной капли.

Так как мощность осмотических сил на два порядка выше онкотических, соли в борьбе за оставшуюся воду «выдавливают» органические вещества на периферию капли. В результате в краевой зоне формируется валик (зона) органических веществ, а в центральной – зона минеральных веществ (здесь кристаллизуются соли). Высушенная капля имеет вид пленки и носит название фации. Анализ структурообразующих элементов дегидратированной капли проводился с помощью стереомикроскопа MZ–12 фирмы Leica при разных режимах микроскопии. Исследованию подвергались натурные образцы высушенных капель (фации), полученные при разных увеличениях в интервале от х25 до х100.

Метод краевой дегидратации водянистой влаги и хрусталиковой жидкости. Аналитическую ячейку готовили на тонких, без царапин стеклах, обезжиренных в спирте и тщательно промытых в дистиллированной воде. Исследуемый материал в количестве 0,02 мл помещали между предметным и покровным стеклами. Для исключения влияния на результат неконтролируемых факторов (искажения плоскости стекол, различия в толщине ячейки и т.д.) одновременно готовили 2 препарата. Образцы водянистой влаги и хрусталиковой жидкости выдерживали при комнатной температуре 48 часов, в течение которых вследствие испарения воды через открытую поверхность между покровным и предметным стеклами происходят переходы «молекулярный раствор – мицеллярный раствор – жидкие кристаллы – твердый кристалл (гель)», характерные для систем липид–вода, в результате которых образуются видимые в поляризованном свете анизотропные морфотипы.

Исследование состава анизотропных морфотипов водянистой влаги и хрусталиковой жидкости проводилась в поляризованном свете.

Оценку морфотипов водянистой влаги и хрусталиковой жидкости в поляризованном свете производили в соответствии с методическими рекомендациями Минздрава РФ № 96/165 «Формообразование кристаллических структур биологических жидкостей при различных видах патологии» (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н., 1998).

В зависимости от состояния локального гомеостаза выделяли 4 основных типа морфотипов:

1 – базисные – морфотипы компенсированного гомеостаза;

2 – вторичные – морфотипы адаптационного гомеостаза;

3 – вторичные с признаками атипии – морфотипы неустойчивого гомеостаза;

4 – атипии – морфотипы декомпенсированного гомеостаза.

При отсутствии образования каких–либо морфотипов диагностировали состояние аморфизации.

Результаты исследования и их обсуждение. Системная организация водянистой влаги при набухающей катаракте характеризовалась глыбчато–кристаллическим типом фаций у 5 пациентов и кристаллическим – у 2. Особенностью системной организации водянистой влаги (глыбчато–кристаллический тип) при этом состоянии было наличие множества трехлучевых трещин в краевой зоне фаций – маркера застойных явлений (рис. 1). Это свидетельствовало о выраженных гидродинамических нарушениях в глазу, связанных с изменением топографии переднего отдела.

Рис. 1. Фрагмент фации водянистой влаги пациента с набухающей катарактой. Микроскопия в проходящем свете, ув. 100

Фация хрусталиковой жидкости представлена на рис. 2. Как видно, краевая зона выполнена множеством трехлучевых трещин. В центральной зоне определяется грубый конгломерат, выступающий над поверхностью фации. Эта морфологическая картина характерна для застойной жидкости, гетерогенной по своему физико–химическому составу.

В поляризованном свете фация хрусталиковой жидкости проявляет анизотропный эффект по ходу трещин, что свидетельствует о взаимодействии белково–липидно–солевых комплексов.

Рис. 2. Фация хрусталиковой жидкости при набухающей катаракте. Микроскопия в проходящем свете, ув. 25

При исследовании локальной организации водянистой влаги отличительным признаком группы больных с набухающей катарактой были пластинчато–дендритные структуры с множеством мелких анизотропных включений (рис. 3, 4).

Рис. 3. Пластинчато-дендритная структура водянистой влаги при набухающей катаракте. Аналитическая ячейка, микроскопия в проходящем свете, ув. 100

Рис. 4. Пластинчато-дендритная структура водянистой влаги при набухающей катаракте с множеством мелких анизотропных включений. Аналитическая ячейка, микроскопия в частично поляризованном свете, ув. 100

В составе морфотипов основным являлся разноцветный атипичный сферолит со вставкой (рис. 5). Такая структура не встречалась у больных с неосложненным течением незрелой катаракты.

Рис. 5. Разноцветный сферолит со вставками в водянистой влаге при набухающей катаракте. Аналитическая ячейка, поляризационная микроскопия, ув. 100

Таким образом, набухающая катаракта, осложняющая течение старческой катаракты, отражается в морфологической картине водянистой влаги и хрусталиковой жидкости появлением атипичных структур и морфотипов, свидетельствующих о резких и глубоких обменных нарушениях в глазу, что может быть использовано в изучении патофизиологических механизмов развития набухающей катаракты.

Опубликовано с разрешения администрации  Русского Медицинского Журнала.